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乳化PCR及回收试剂盒图片
产品货号:
KL240619
中文名称:
乳化PCR及回收试剂盒
英文名称:
Emulsion PCR and Recovery Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

本制品是即用型乳化PCR(Emulsion PCR,ePCR)试剂盒,含乳化剂、PCR预混液和破乳剂,广泛用于乳化PCR反应。



产品特点:
  • 方便,用户只需准备模板和引物即可以进行ePCR实验。
  • 操作步骤经过精心优化,变异系数小。
  • 扩增效率和灵敏度更高。
  • 本制品扩增和纯化后可以进行电泳检测。本试剂盒不含电泳试剂。


产品组成:
组分规格保存
2×ePCR MasterMix375μL-20℃
ePCR乳化剂11875μL室温,避光
2mL本色管5支室温
双蒸水330μL
石蜡油0.5mL
核酸浓缩剂2.5mL
磁力搅拌棒2根

保存:室温,其中2×ePCR MasterMix置于-20℃,有效期1年。

使用方法:
一、ePCR体系制备
  • 取375μL ePCR乳化剂1,置于预冷的2mL本色管中,管中加1根磁力搅拌棒,置于磁力搅拌器上,25℃,1700×g预搅拌,保持搅拌状态备用。
  • 取1.5mL微型离心管,在25℃条件下按下表所列成分加入试剂,制成ePCR乳化剂2。
    成分用量
    2×ePCR MasterMix75μL
    自备引物F3μL
    自备引物R3μL
    DNA模板3μL
    双蒸水66μL
  • 在25℃条件下,按体积比1:2.5的比例将ePCR乳化剂2逐滴滴入不停搅拌的ePCR乳化剂1中,并且ePCR乳化剂2必须在2min中内全部滴加完毕,当全部滴加完后,继续搅拌5min使其形成乳液。
  • 取10只PCR管,将乳液按每管50μL分装,并每管覆盖10μL石蜡油,防止体系挥发。


二、ePCR
  1. 盖上盖子后上机,按下面参数进行ePCR。
    过程温度时间
    预变性95℃2min
    PCR反应
    (30个循环)
    95℃30sec
    55℃30sec
    72℃30sec
    72℃30sec


三、ePCR反应产物回收
  1. 按1:1的比例将扩增产物与核酸浓缩剂混合,震荡使溶液充分混匀。
  2. 室温12000×g离心30秒,小心吸弃上清。
  3. 剩下的下层溶液即为浓缩后的核酸溶液。
    一次抽提可以使核酸溶液的体积减少20%(以加入浓缩剂的体积为100%),重复上述浓缩步骤直到核酸溶液达到所需要的体积。本方法不能除盐,因此核酸溶液中的盐离子,如果有的话,将随核酸的浓缩而浓缩。

相关搜索:乳化PCR及回收试剂盒ePCR试剂盒Emulsion PCR and Recovery Kit
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