产品货号:
KL240619
中文名称:
乳化PCR及回收试剂盒
英文名称:
Emulsion PCR and Recovery Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:
产品特点:
产品组成:
保存:室温,其中2×ePCR MasterMix置于-20℃,有效期1年。
使用方法:
一、ePCR体系制备
二、ePCR
三、ePCR反应产物回收
相关搜索:乳化PCR及回收试剂盒,ePCR试剂盒,Emulsion PCR and Recovery Kit
本制品是即用型乳化PCR(Emulsion PCR,ePCR)试剂盒,含乳化剂、PCR预混液和破乳剂,广泛用于乳化PCR反应。
产品特点:
- 方便,用户只需准备模板和引物即可以进行ePCR实验。
- 操作步骤经过精心优化,变异系数小。
- 扩增效率和灵敏度更高。
- 本制品扩增和纯化后可以进行电泳检测。本试剂盒不含电泳试剂。
产品组成:
| 组分 | 规格 | 保存 |
| 2×ePCR MasterMix | 375μL | -20℃ |
| ePCR乳化剂1 | 1875μL | 室温,避光 |
| 2mL本色管 | 5支 | 室温 |
| 双蒸水 | 330μL | |
| 石蜡油 | 0.5mL | |
| 核酸浓缩剂 | 2.5mL | |
| 磁力搅拌棒 | 2根 |
保存:室温,其中2×ePCR MasterMix置于-20℃,有效期1年。
使用方法:
一、ePCR体系制备
- 取375μL ePCR乳化剂1,置于预冷的2mL本色管中,管中加1根磁力搅拌棒,置于磁力搅拌器上,25℃,1700×g预搅拌,保持搅拌状态备用。
- 取1.5mL微型离心管,在25℃条件下按下表所列成分加入试剂,制成ePCR乳化剂2。
成分 用量 2×ePCR MasterMix 75μL 自备引物F 3μL 自备引物R 3μL DNA模板 3μL 双蒸水 66μL - 在25℃条件下,按体积比1:2.5的比例将ePCR乳化剂2逐滴滴入不停搅拌的ePCR乳化剂1中,并且ePCR乳化剂2必须在2min中内全部滴加完毕,当全部滴加完后,继续搅拌5min使其形成乳液。
- 取10只PCR管,将乳液按每管50μL分装,并每管覆盖10μL石蜡油,防止体系挥发。
二、ePCR
- 盖上盖子后上机,按下面参数进行ePCR。
过程 温度 时间 预变性 95℃ 2min PCR反应
(30个循环)95℃ 30sec 55℃ 30sec 72℃ 30sec 72℃ 30sec
三、ePCR反应产物回收
- 按1:1的比例将扩增产物与核酸浓缩剂混合,震荡使溶液充分混匀。
- 室温12000×g离心30秒,小心吸弃上清。
- 剩下的下层溶液即为浓缩后的核酸溶液。一次抽提可以使核酸溶液的体积减少20%(以加入浓缩剂的体积为100%),重复上述浓缩步骤直到核酸溶液达到所需要的体积。本方法不能除盐,因此核酸溶液中的盐离子,如果有的话,将随核酸的浓缩而浓缩。
相关搜索:乳化PCR及回收试剂盒,ePCR试剂盒,Emulsion PCR and Recovery Kit
